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【Mirus新品推荐】TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent

时间:2018-04-27 作者:市场部 文章来源:——重组腺相关病毒/慢病毒生产的首选 浏览:1520

 


Mirus公司新推出转染试剂TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent,该产品旨在增强载体转染到

贴壁或悬浮HEK 293细胞的转染效率,并增加重组腺相关病毒或慢病毒的产量。







 

使用TransIT-VirusGEN®转染试剂转染悬浮或贴壁HEK293细胞可获得最高的转染效率使用不同的转

染试剂将pAAV-hrGFPpAAV-RCpAAV-Helper(按照1:1:1比率,1.5μgAgilent)转染到悬浮

Ffeestyle –F细胞(培养于FreeStyleTM F17培养基, A)和贴壁的293T / 17细胞(B)中:TransIT-Vir

usGEN2:1, vol:wt),Lipofectamine 20003:1),Lipofectamine 30003:3:1)和25kDa PEI

4:1)。收获的病毒用于转导HT1080细胞,转导后48h后,使用guava easyCyte TM 5HT流式细胞

检测GFP表达。功能性滴度根据病毒的稀释液与20% GFP阳性细胞进行计算




 

使用TransIT-VirusGEN®转染试剂转染悬浮或贴壁HEK293细胞可获得最高的转染效率。使用不同的转

染试剂将pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP TM载体和Lentivirus慢病毒混合物(1:1)转染到悬浮Ffeest

yle –F细胞(培养于FreeStyleTM F17培养基, A)和贴壁的293T / 17细胞(B)中: TransIT-VirusGE

N® (3:1, vol:wt), Lipofectamine® 2000 (2:1 (A)3:1 (B)), Lipofectamine® 3000 (2:2:1 (A) 3:3:1

 (B)) 25 kDa PEI (4:1)。收集上清液,过滤(0.45μm),使用293T / 17细胞滴定。 使用8μg/ ml Tr

ansduceIT TM进行慢病毒转导,72h后使用guava easyCyte5HT流式细胞仪检测GFP表达情况。

功能性滴度根据病毒的稀释液与20% GFP阳性细胞进行计算



 

TransIT-VirusGEN®转染试剂的强扩展性。使用TransIT-VirusGEN®转染试剂2:1 (vol:wt), Mirus

pAAV-hrGFPpAAV-RCpAAV-Helper(按照1:1:1比率,1.5μg/mlAgilent)转染到悬浮Ffee

style F细胞(培养于FreeStyleTM F17培养基, A)和贴壁的293T / 17细胞(B)中。收获的病毒用于

转导HT1080细胞,转导后48h后,使用guava easyCyte TM 5HT流式细胞仪检测GFP的表达。功能性

滴度根据病毒的稀释液与20% GFP阳性细胞进行计算。


 



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