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Bioxcell抗体常见问题

2021-06-08
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● Bioxcell抗体如何储存?

请将抗体置于4℃避光储存。即使分装后,也不推荐将抗体冷冻储存,因为冻融循环会导致抗体活性降低。一般来说,蛋白在高浓度条件下储存不易降解,因此应避免将抗体稀释至工作浓度后在4℃条件下储存超过一天,即应现用现配。按要求储存且保证抗体无菌,抗体活性可保持长达一年甚至更长时间。


● 收到产品后应如何处理?

收到抗体后,在分装储存及使用时需在生物安全柜中进行,并使用无菌枪头、离心管、注射器和缓冲液等,降低污染率。另外,使用前抗体要处于低温状态。


● Bioxcell产品的保质期是多久?

如果按说明书要求储存产品,BioXCell的产品自收到之日起一年内保持稳定。


● Bioxcell抗体以何种形式提供?

Bioxcell抗体均以无菌PBS缓冲液的形式提供。该溶液中不含稳定剂、防腐剂、载体蛋白、甘油或任何其他添加剂。PBS缓冲液由Na2HPO4、NaH2PO4和NaCl组成,每个成分的具体摩尔浓度由抗体pI值决定,即抗体的pI值决定了PBS缓冲液的pH值。如有特殊要求,Bioxcell可以在其他缓冲液中提供抗体,但不能提供冻干粉末抗体。


● Bioxcell抗体的浓度是多少?

Bioxcell不同批次抗体的浓度不同,但一般来说是在4到10mg/mL之间。包装的离心管上会标记抗体的具体浓度。如果需要在订购之前知道产品的确切浓度,请联系欣博盛生物。


● Bioxcell抗体的氨基酸或DNA序列是什么?

Bioxcell抗体是使用杂交瘤技术生产的,所以抗体的氨基酸或DNA序列是未知的。


● Bioxcell抗体的抗原表位是什么?

BioXcell不提供抗原表位信息,请客户自行参考文献。


● 应如何稀释抗体至工作浓度?

建议使用官网推荐的InVivoPure稀释缓冲液稀释Bioxcell抗体。在没有InVivoPure稀释缓冲液的情况下,可以使用与抗体PBS缓冲液pH相同或相近的的无菌PBS,以避免蛋白聚集。稀释时,建议使用预冷缓冲液,并在生物安全柜中操作,使用无菌枪头、试管、注射器和缓冲液来保持抗体的无菌性。应避免将抗体稀释至工作浓度后在4℃条件下储存超过一天。


● Bioxcell抗体是否适用于体内注射实验?

Bioxcell产品均适用于体内实验研究,它们以PBS的形式提供,不含叠氮化物等防腐剂或BSA等蛋白质稳定剂,内毒素水平< 2EU/mg(InVivoMab),符合大多数体内研究的条件。为了满足更严格的实验要求,Bioxcell还可提供更低内毒素水平的抗体<1EU/mg(InVivoPlus)。注:有些产品厂家未经过体内实验验证,具体请参考产品的Reported Applications。


● Bioxcell抗体在体内的半衰期是多久?

厂家没有抗体在体内的半衰期数据。因为抗体的半衰期是高度可变的,并且受到物种、同型、抗原分布、抗原浓度和许多其他因素的影响。建议阅读感兴趣抗体已发表的相关文献,参考与您实验条件及设计相近的实验数据,预估抗体的半衰期。


● 实验时应多久注射一次?每次注射多少抗体?

实验中很多细节都会影响抗体的最佳使用量及注射频率,例如小鼠品系、疾病模型、实验持续时间、目标组织、抗原浓度等等。因此,客户最好通过阅读相关的参考文献确定最佳使用剂量及注射频率的范围,在此基础上进行优化。建议客户在正式实验之前,先做一个小规模的预实验,以摸索最适的实验条件。注:Bioxcell官网每个产品介绍页下面都会有最新的参考文献供客户参考。


● Bioxcell InVivoMab和InVivoPlus两种级别的抗体有什么区别?

InvovoPlus级别的产品内毒素含量更低,经过多种实验验证,更适合用于体内实验研究,具体区别请见下表:


InVivoMabInVivoPlus
纯度>95%>95%
蛋白完整性√(verified via SDS-PAGE)√(verified via SDS-PAGE)
内毒素浓度<2 EU/mg<1 EU/mg
不含叠氮化物和载体蛋白
是否适用于体内研究
是否提供大包装
是否经WBFCELISA验证
验证蛋白聚集≤5%
是否经过鼠科病原体检测
产品货号BE-开头BP-开头


● 抗体收到后有漂浮物、絮状沉淀或聚集物是否正常?应如何处理?

温度变化、冻融、运输过程中的震动或长期贮藏等环境条件可能会导致蛋白质聚集,这些聚集物可能会沉淀在离心管的底部,或漂浮溶液中,因此收到抗体后有少量的絮状物属于正常现象。可在室温下通过轻微的震动、过滤或离心去除。


● 没注意说明书上的储存要求,将抗体置于室温储存了一段时间,或者抗体过了一年的有效期,是否还可以继续使用?

一般来说,室温下放置几个小时不会影响抗体的活性,但是放置几天或者更长时间则有可能会导致蛋白降解,影响抗体活性。但抗体是否可继续用于后续实验,需进行相关的活性测试。为确认抗体是否降解,最简单的方法是取大约10ug的抗体进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。在非还原条件下,如果在抗体分子量位置只有一条条带,则表明抗体未降解,如果蛋白质未通过凝胶迁移,或者有许多其他的条带,则表明抗体已降解。但这个测试只是验证抗体是否降解,不能确认抗体功能是否正常。确认抗体在体内是否起作用的唯一方法是进行小规模的体内测试,以验证抗体功能的完整性。




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