Chondrex 天狼猩红总胶原检测试剂盒使用指南
天狼猩红(Sirius Red,也称天狼星红)是一种独特的染料,能够特异性地结合纤维状胶原(I - V 型)上的 [Gly-X-Y]n 三股螺旋结构。由于该结合特性不区分胶原的物种来源与具体亚型,因此可全面反映样本中的“总胶原”含量。检测时染料与胶原结合形成复合物,经离心洗涤去除游离染料后,用提取液将复合物溶解,最终以比色法在 510–550 nm 波长(推荐 530 nm)下读取吸光度进行定量。
Chondrex 公司天狼猩红(Sirius Red)总胶原检测试剂盒(货号 9062,管式检测法)正是基于上述特点进行开发的一款高效、可靠的总胶原定量分析工具。产品采用经典管式反应结合比色法定量,可在极短时间内完成样本中总胶原含量的测定,兼容组织、细胞及培养基等多种样本,操作简便、通量高,是结缔组织研究、纤维化疾病模型评估与细胞外基质分析的理想选择。
注意:本产品为管式检测法试剂盒(9062),与板法试剂盒(9062P)不同。
试剂盒的核心优势与亮点
• 极速高效:整个检测流程耗时不到 30 分钟,大幅缩短实验周期。
• 高通量:配合带可拆条的 96 孔 ELISA 板,每块板可处理 40 个样本(复孔检测)。
• 广泛适用:覆盖组织匀浆、细胞培养基、培养细胞等多种样本,覆盖 I–V 型胶原。
• 灵敏可靠:标准检测范围 8 µg/ml 至 500 µg/ml,结果稳定,重复性好。
试剂盒组分
组分名称 | 组分编号 | 规格 | 储存 |
标准品 — 牛 I 型胶原 | 90621 | 0.5 mg/ml,1 ml | -20°C |
Sirius Red 溶液 | 90622 | 50 ml | -20°C |
洗涤液 | 90623 | 50 ml | -20°C / 室温* |
提取液 | 90624 | 30 ml | -20°C / 室温* |
0.5M 醋酸(10X) | 90625 | 20 ml | -20°C / 室温* |
96 孔板(8 ×12) | 9026 | 1 块 | -20°C / 室温* |
* 洗涤液、提取液、0.5M 醋酸及 96 孔板亦可室温保存。细胞培养基样本所用的浓缩液(货号 90626)不含在本试剂盒内,需另行订购。
适用样本与处理要点
一、固体样本(组织、培养细胞)
固体样本需先溶解后方可用于本检测,根据所选溶解方法的不同,以下各类可溶性胶原样本均可用于本检测:
➧ 盐溶性胶原(0.15 M NaCl,溶于 0.1 M Tris-HCl,pH 7.4)
➧ 酸溶性胶原(0.05 M 乙酸)
➧ 胃蛋白酶可溶性胶原(含胃蛋白酶的 0.05 M 乙酸溶液)
Chondrex, Inc. 推荐使用其‘’Tips for Collagen Solubilization‘’来制备胃蛋白酶可溶性胶原样本。请联系我们以获取样本制备方案。
二、液体样本(细胞培养基)
培养基中胶原含量通常较低,很难在本试剂盒的标准曲线范围内直接检测到培养基样本中的胶原,因此建议使用专用浓缩液(货号 90626,需另购)进行浓缩处理,并设置培养基阴性对照。含高浓度血清的培养基会抬高背景值,建议先用 PBS 将血清浓度降至约 5% 后再处理。
三、关键注意事项
本试剂盒仅可检测样本中已溶解的天然(未变性)胶原,热变性胶原与 Sirius Red 的结合力会下降,可能导致结果被低估,提取与处理过程中应避免过度加热。
如果实验需要区分天然胶原与变性胶原,可搭配使用羟脯氨酸试剂盒(货号 6017)测定样本全部总胶原(包含天然 + 变性胶原);羟脯氨酸检测结果与天狼猩红试剂盒结果的差值即代表变性胶原水平。
简要检测流程
其他相关产品
➧ 板法-天狼猩红总胶原检测试剂盒(9062P):
品牌 | 货号 | 品名 |
Chondrex | Sirius Red Total Collagen Detection Assay PLATE Kit | |
Chondrex | Hydroxyproline Assay Kit |
试剂盒(9062)为管式检测法,反应与洗涤在离心管中完成;9062P 为板法试剂盒,直接在微孔板内反应与洗涤。二者原理一致,可按实验习惯与通量需求选择。
➧ 分型检测试剂盒
若需对胶原亚型(如 I 型、II 型)进行精确定量,推荐搭配 Chondrex I 型 / II 型胶原检测 ELISA 试剂盒:
品牌 | 货号 | 品名 |
Chondrex | Mouse Type I Collagen Detection Kit | |
Chondrex | Rat Type I Collagen Detection Kit | |
Chondrex | Bovine Type I Collagen Detection Kit | |
Chondrex | Porcine Type I Collagen Detection Kit | |
Chondrex | Rabbit Type I Collagen Detection Kit | |
Chondrex | Type II Collagen Detection Kit, Multi-Species | |
Chondrex | Canine Type I Collagen Detection Kit | |
Chondrex | Human Type I Collagen Detection Kit |
Chondrex公司成立于1996年,专注研发、生产、销售高品质的试剂如高纯度软骨胶原、抗胶原单克隆抗体,为广大科研人员提供用于研究风湿性关节炎的发病机制、研发及筛选潜在治疗方法的有力工具。目前,Chondrex仍然是炎症研究优质试剂领导者,为全球学术、生物技术开发、制药企业服务。另外,Chondrex也为其他重要的炎症疾病如肾炎、过敏性气喘提供试剂产品。
如需咨询更多产品详情,请联系Chondrex中国授权代理商-欣博盛生物
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