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在研究分子相互作用时，了解一组给定配位体和分析物的结合动力学和亲和力常数是很有意义的。当需要使用未标记的分子进行这样的实验时，例如，当荧光标记基团太大而无法链接或被怀疑会改变结合动力学时，表面等离子体共振就是一种优选的技术。简而言之，一个待测的配体被固定在一层金属薄膜上，该薄膜被固定在一个由棱镜支撑的载玻片上。将偏振光以固定的角度射向棱镜和金属薄膜表面，任何分子与配体的结合都会增加分子复合物的质量，进而导致共振角发生改变，这一改变即可被仪器检测到。SPR检测技术通常在流动条件下进行，因此能够实时监测未标记的配偶体之间的相互作用。有关糖生物学和SPR的更多信息，可参见Duverger等人的综述(Ref.76)。

 精选文献 

• Discerning the glycans on a target molecule (such as antibodies) (Refs.12 and 13)

• Probing the binding specificity or behavior of a lectin (Refs.25 and 26)

• Disease specific biomarker and bioanalytic testing (Ref. 50)

 实验流程概览 

样本制备

• 采用合适的偶联物（如葡聚糖）将待测目标固定在芯片上；

• 用running buffer (如含0.005% Tween-20的PBS)清洗流动池（flow cell）。

封闭

• 用1.0 M的乙醇胺/HCl(pH 8.5)封闭active flow chamber 10分钟；

• 使用running buffer进行清洗。

反应和检测

• 在室温(21-24°C)下，以10L/分钟的速度将未标记的纯化凝集素在流动室中流动3分钟。建议使用CFB溶液（Vectorlabs,SP-5040-125)作为样品缓冲液。

• 在每个检测之间用pH值为2.0的10mM 甘氨酸和10mM NaOH 对芯片表面进行 1 分钟的再生处理，以去除上一次运行中的所有结合。

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