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来自TriLink的Next-level体外转录（IVT）试剂盒

发布日期：2026-01-13

编辑：市场部

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来自TriLink的Next-level体外转录（IVT）试剂盒

体外转录技术（In Vitro Transcription，IVT）是指在无细胞体系中，以 DNA 为模板，利用 RNA 聚合酶催化合成 RNA 分子的技术。其核心优势是无需依赖活细胞，可快速、定向生产高纯度、高特异性的 RNA（如 mRNA、siRNA、shRNA、rRNA 等），且能通过修饰优化 RNA 的稳定性、翻译效率或免疫原性，已成为分子生物学、基因治疗、疫苗研发等领域的核心工具。

CleanCap^® IVT试剂盒：简而不凡

TriLink的CleanCap^® IVT试剂盒通过体外转录及 CleanCap^® 共转录加帽合成 mRNA 所需的全部核心组分。极大的优化了RNA合成与加帽流程，同时显著提升实验结果，是高性能RNA合成的一体化解决方案。

CleanCap^® 目前有两款高效的mRNA合成Kit，无论您是IVT领域的新手，还是想要将蛋白表达效率最大化，这两款试剂盒都可以助您一步获得高产量、低dsRNA的加帽mRNA：

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CleanCap^® AG (3' OMe) CleanScript™ IVT Kit ：

通用性强，无需过多优化；采用CleanCap^® AG (3' OMe) 帽类似物，是原始CleanCap^® AG的改良版本，可实现更高的蛋白表达水平。

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CleanCap^® M6 High Yield IVT Kit：

包含TriLink最新的帽类似物CleanCap^® M6，相较于酶法加帽和CleanCap^® AG类似物，可以实现更高的蛋白表达；为了实现最佳产率，需要对5' UTR序列进行评估。

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图一：mRNA的帽结构会影响蛋白表达水平。采用 CleanCap M6 帽类似物的mRNA，其蛋白表达水平高于其前代产品（A）及酶法加帽技术(B)。

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图二：TriLink的新型RNA聚合酶可以显著降低mRNA合成过程中dsRNA的形成。在使用 CleanCap AG（3′OMe）和 CleanCap M6 帽类似物合成未修饰或 N1 - 甲基假尿苷（N1 MePsU）修饰的 mRNA 时，CleanScribe™ RNA 聚合酶可显著减少dsRNA的形成。

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图三：优化的IVT方案可显著提高 CleanCap AG（3’OMe） mRNA的产率。 采用TriLink的CleanScript IVT方案，CleanCap AG（3’OMe）mRNA浓度最高可达10 mg/mL，较传统方案提升高达两倍。

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图四：脉冲进料可以进一步提高CleanCap M6 mRNA的产率。 经2h脉冲进料（操作方法参考protocol）后，CleanCap M6 mRNA 的产率最高可达10mg/ml，相较于传统流程提升近2倍。

两款Kit如何选择呢？

	CleanCap^® AG (3' OMe) CleanScript™ IVT Kit	CleanCap^® M6 IVT Kit, High Yield
操作经验	通用序列兼容性强，适合该开始进行mRNA研究的用户	优化蛋白表达，适合希望最大限度提高mRNA表达和整体效力的客户
帽类似物	CleanCap^® AG (3' OMe)	CleanCap^® M6
蛋白表达水平	+++	++++
可合成的RNA类型	mRNA	mRNA
序列兼容性	通用性强-适用所有UTR	5' UTR序列可能影响产率
转录起始位点	AG起始	AG起始
包含的修饰rNTP	N1 - 甲基假尿苷	N1 - 甲基假尿苷
包含的10×缓冲液	CleanScript™ 体外转录缓冲液	M6体外转录缓冲液
包含的酶混合物	AG CleanScribe™ RNA 聚合酶混合物	M6 CleanScribe™ RNA 聚合酶混合物
每100 µL反应预期产率	0.8-1mg	0.8-1mg

下方表格对两款试剂盒的特性进行了对比，两款产品根据对蛋白表达水平、下游应用及IVT操作经验的不同需求，提供了各自独特的优势。您可以根据具体需求，选择最适合您的试剂盒。

订购信息：

产品名称	货号	反应规格
CleanCap^® AG (3' OMe) CleanScript™ IVT Kit	K-7413-25	25 x 100 μL 或 125 x 20 μL
CleanCap^® M6 IVT Kit, High Yield	K-7453-25	25 x 100 μL 或 125 x 20 μL

CleanCap^® AG (3' OMe) CleanScript™ IVT Kit中组分：

Component	Concentration	Amount
CleanCap^® Reagent AG (3′ OMe)	100 mM	10 µmol
Adenosine-5′-Triphosphate	100 mM	100 µmol
Cytidine-5′-Triphosphate	100 mM	100 µmol
Guanosine-5′-Triphosphate	100 mM	100 µmol
Uridine-5′-Triphosphate	100 mM	100 µmol
N1-Methyl-Pseudouridine-5′-Triphosphate	100 mM	100 µmol
AG CleanScribe™ RNA Polymerase Mix	10X	250 µL
10X AG CleanScript™ IVT Buffer	10X	1 mL
FLuc Control Plasmid	0.5 µg/µL	25 µg

CleanCap^® M6 IVT Kit中组分：

Component	Concentration	Amount
CleanCap^® Reagent M6	100 mM	25 µmol
Adenosine-5′-Triphosphate	100 mM	100 µmol
Cytidine-5′-Triphosphate	100 mM	100 µmol
Guanosine-5′-Triphosphate	100 mM	100 µmol
Uridine-5′-Triphosphate	100 mM	100 µmol
N1-Methyl-Pseudouridine-5′-Triphosphate	100 mM	100 µmol
M6 CleanScribe™ RNA Polymerase Mix	10X	250 µL
10X M6 IVT Buffer	10X	1 mL
FLuc Control Plasmid （linearized）	0.5 µg/µL	25 µg

相关产品

可用作对照的目录mRNA

产品名称	货号	规格
CleanCap^® M6 EGFP mRNA (N1MePsU)	L-8101	0.1mg、1mg、5mg或定制
CleanCap^® M6 FLuc mRNA (N1MePsU)	L-8102
CleanCap^® M6 mCherry mRNA (N1MePsU)	L-8103
CleanCap^® M6 Cas9 mRNA (N1MePsU)	L-8106
CleanCap^® M6 EPO mRNA (N1MePsU)	L-8109
CleanCap^® M6 Cre mRNA (N1MePsU)	L-8111

常见问题

Q：我该如何选择这两款试剂盒？

A：试剂盒的选择取决于您期望的蛋白表达水平、下游应用场景，以及您的 IVT（体外转录）实验经验。

CleanCap^® AG (3' OMe) CleanScript™ IVT kit：这是一款通用性强的试剂盒，仅需少量优化即可合成高产量、低双链 RNA（dsRNA）的加帽 mRNA。经证实，CleanCap® AG (3' OMe) 帽类似物比初代 CleanCap^® AG 帽类似物的蛋白表达水平更高，且已应用于商业化获批的 mRNA 疫苗中。

CleanCap^® M6 IVT kit（High yeild）：该试剂盒包含最新的 CleanCap^® M6 帽类似物，适合追求比酶法加帽及前代 CleanCap^® AG 类似物更高蛋白表达的用户。若要通过标准方案达到最高 5 mg/mL 的产量，或通过补充脉冲进料方案达到 10 mg/mL 的产量，用户可能需要评估自身 5'-UTR序列的兼容性。

Q：可以用这两个试剂盒来制备不加帽的mRNA吗？

A：对于CleanCap^® AG（3' OMe）和CleanCap^® M6 IVT试剂盒，你可以在我们提供的protocol中省略加帽步骤，从而获得无帽mRNA，预期产量相近。不过，如果你的模板是“AG起始”，5'端的异质性会更高（例如A和G的混合物）。根据无帽mRNA的应用需求，若有需要，可通过磷酸酶处理去除5'三磷酸基团。

Q：使用 CleanCap^® M6 帽类似物合成的 mRNA，其翻译效率与 CleanCap^® AG (3' OMe) 帽类似物及酶法加帽相比如何？

A：通过体外和体内实验，我们持续观察到：与 CleanCap AG (3' OMe) 帽类似物及酶法加帽的 mRNA 相比，用 CleanCap M6 加帽的 mRNA 蛋白表达水平更高（提升幅度≥30%）。

这种蛋白表达的提升，部分原因可能是 CleanCap M6 类似物上的 N6 - 甲基化腺苷抑制了 Dcp2 介导的脱帽作用。（DOI: 10.1016/j.omtn.2025.102456 External Link）

Q：5'UTR序列会对CleanCap^® M6 IVT 试剂盒产生什么影响？

A：我们观察到，CleanCap M6 IVT 试剂盒的产量可能会受到部分 5'UTR 序列的影响。如果您对自己使用的UTR序列有顾虑，请联系我们获取技术支持。

Q：如何优化 mRNA 的 5'UTR 和 3'UTR 序列？

A：mRNA 的5'UTR和3'UTR的优化取决于您的具体研究目的，以及 mRNA 对应的靶细胞或组织类型。

为支持这一需求，TriLink的Officinae Bio 服务提供专业的优化服务：您只需提供您的序列和 UTR 信息，TriLink会进行密码子优化，以帮助实现最佳表达效果。

此外，查阅已发表的文献是确定与您的应用场景相关的UTR序列的有效方式。我们也建议开展筛选实验，以评估翻译效率。

如果您使用的是 TriLink的mRNA 服务，我们在 DNA 模板中集成了自主 UTR 序列选项，您可以将开放阅读框（ORF）插入其中，从而简化实验流程。